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核酸检测

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      一、核酸检测:

  • 概念内涵:核酸是在细胞核里面的一类生物聚合物,是所有已知生命均有的生物化学成份,参与遗传物质保存、繁殖等生化合成和细胞代谢,决定着细胞或机体的性状表现。

每一个生物的核酸是不一样的,研究人员通过分析致病微生物核酸内部的基因学序列,进行临床病因学的确诊,来确定人们身上是否带有病毒。

  目前的病毒核酸检测试剂盒,多数采用荧光定量PCR方法。检测原理是以病毒独特的基因序列为检测靶标,通过PCR扩增,使我们的选择这段靶标DNA序列指数级增加,每一个扩增出来的DNA序列,都可与我们预先加入的一段荧光标记探针结合,产生荧光信号,扩增出来的靶基因越多,累计的荧光信号就越强。所以,核酸检测,其实就是通过检测荧光信号的累积来确定样本中是否有病毒核酸。

  • 核酸检测过程:

       新华社带您一分钟了解核酸检测过程

核酸检测员是使用仪器和试剂,对核酸样品进行管理、提取、检测并出具相应检测报告的人员。 
2020年5月,人社部公布了拟发布的10个新职业,核酸检测员上榜。 
  • 工作任务:
1.负责样品的入库、存放和出库;
2.提取、纯化核糖核酸或脱氧核糖核酸;
3.对提取后的核酸进行实时荧光定量聚合酶链式反应检测;
4.构建文库,并根据测序标准进行文库质量的检测与鉴定;
5.使用高通量测序仪对核酸文库进行碱基序列的测定;
6.分析高通量测序仪得出的数据并出具报告;
7.对高速冷冻离心机、恒温震荡器、移液器等仪器进行日常清洁、维护和管理;
8.配置、存放和管理核酸提取试剂、建库试剂和测序试剂。 

    二、提出者

核酸研究已有100多年的历史,本世纪60年代末、70年代初人们致力于研究基因的体外分离技术。

Korana 于1971年最早提出核酸体外扩增的设想:“经过DNA变性,与合适的引物杂交,用DNA聚合酶延伸引物,并不断重复该过程便可克隆tRNA基因”。

1983年的一天,美国科学家Kary Mulis设计出了PCR技术的原型。他在实验上证明了PCR的构想,并于1985年申请了有关PCR的第一个专利,在Science杂志上发表了第一篇PCR的学术论文。从此PCR技术得到了生命科学界的普遍认可。

Kary Mulis也因此获得了1993年的诺贝尔化学奖。

   三、相关历史情况

核酸研究已有100多年的历史,本世纪60年代末、70年代初人们致力于研究基因的体外分离技术,Korana 于1971年最早提出核酸体外扩增的设想:“经过DNA变性,与合适的引物杂交,用DNA聚合酶延伸引物,并不断重复该过程便可克隆tRNA基因”。
1983年的一天,美国科学家Kary Mulis驱车在蜿蜒的州际高速公路上行驶中,孕育出了PCR技术的原型。他在实验上证明了PCR的构想,并于1985年申请了有关PCR的第一个专利,在Science杂志上发表了第一篇PCR的学术论文。从此PCR技术得到了生命科学界的普遍认可,Kary Mulis也因此获得了1993年的诺贝尔化学奖。 Mullis最初使用的DNA聚合酶是大肠杆菌DNA聚合酶 I的Klenow片段,其缺点是酶不耐高温,90℃会变性失活,每次循环都要重新加。 1988年Saiki等人从温泉中分离的一株水生嗜热杆菌中提取到一种耐热DNA聚合酶,克服了这个缺点,从而使PCR技术得到了广泛的应用,也使PCR成为遗传与分子分析的根本性基石。
经过十几年的发展,PCR成为实验室的常规技术。它是现代分子生物学研究中不可缺少的手段,是一种极为敏感的放大系统。相比于传统的临床诊断方法,核酸诊断是分子水平上的诊断技术,可以弥补传统临床诊断方法的某些缺陷,比如,核酸诊断能直接揭示病原体的存在,能客观反映病原体在人体内感染及活动情况,可以作为临床治疗中的一个有效监控手段,另外采用核酸诊断技术还可以检测到常规检测方法难以检测到的病原体,例如可以克服酶免检测技术中从感染到抗体产生的窗口期问题。因此,以PCR技术为代表的核酸诊断技术在临床诊断中得到日益广泛的应用
四、影响与评价
核酸是生物体内的高分子化合物,包括脱氧核糖核酸DNA和核糖核酸RNA两大类,广泛存在于所有动植物、微生物及生物体内。核酸与蛋白质结合形成核蛋白。不同的核酸,其化学组成、核苷酸排列顺序不同。核酸不仅是基本的遗传物质,而且在蛋白质的生物合成上也占有重要的位置,因而在生长、遗传、变异等一系列重大生命现象中起决定性的作用。通过核酸的检测,对肿瘤的发生,病毒的感染以及射线对人体的影响等都有重要的临床意义。
 
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